Microscope

Dans de plus en plus de secteurs de l'industrie, il est nécessaire d'agrandir les objets visuellement, aussi bien pour le contrôle de la qualité que dans la production. Le microscope est un outil idéal pour cela, puisqu'il est disponible sous différents types et variantes, que vous pouvez sélectionner en fonction de vos nécessités.

Il existe le microscope classique, monoculaire ou binoculaire, dans lequel on regarde à travers un oculaire (microscope monoculaire) ou deux oculaires (microscope binoculaire). Cependant, chaque utilisateur doit régler l'optique selon ses propres paramètres visuels.

Le microscope trinoculaire dispose d'une troisième lentille pour connecter une caméra numérique ou un appareil photo, ce qui permet à l'utilisateur de documenter l'inspection des objets avec des images. D'un autre côté, vous pouvez utiliser la caméra pour transférer les images sur un écran supplémentaire ou à un ordinateur, pour que d'autres employés puissent aussi les visualiser.

Le microscope numérique est le modèle que l'on retrouve de plus en plus dans l'industrie. Au lieu de regarder à travers les oculaires, l'image est directement transférée sur un écran numérique, ce qui facilite le travail en équipe et permet de prendre des décisions de manière plus efficiente. Cela simplifie aussi le traitement numérique des images visualisées. En fonction de l'équipement du microscope, les images et les vidéos peuvent être sauvegardées dans un support de stockage ou directement dans l'ordinateur via une connexion à un PC. D'autre part, il est possible d'effectuer des mesures en utilisant le logiciel adapté; ces données pourront être utilisées pour des protocoles internes. En particulier dans le domaine du contrôle de la qualité, il est possible d'éliminer les produits défectueux, ce qui garantit ainsi la qualité souhaitée.

Pour sélectionner le microscope adéquat, il faut définir d'abord les grossissements nécessaires à l'examen de vos objets. Un autre facteur à prendre en compte pour le microscope vertical est que la taille de l'échantillon, la distance de travail et les objectifs soient directement liés entre eux. Cela signifie que, plus le grossissement des objectifs est grand, plus la distance de travail est petite, ce qui implique à son tour que les dimensions de l'objet de test sont en lien avec la distance de travail du microscope. Pour obtenir des images nettes avec une résolution optimum, il est important que l'éclairage soit homogène, ce qui est garanti par les lampes halogènes ou les LEDs intégrées au microscope. Si cela ne suffit pas, vous pouvez accentuer l'éclairage au moyen de sources lumineuses externes, comme par exemple, une lumière annulaire ou une source lumineuse à bras flexible (col de cygne). Comme indiqué plus haut, l'affichage agrandi peut se faire de plusieurs façons: affichage direct sur un écran, enregistrement des données (images et vidéos) dans un support de stockage ou directement dans un ordinateur.

Microscope: Agrandissements
L'agrandissement est le résultat de multiplier l'augmentation de l'objectif par l'augmentation de l'oculaire. Par exemple : le Microscope binoculaire: augmentation de l'oculaire de 12,5 et augmentation de l'objectif entre 0,8 et 4,0. Le résultat de l'augmentation totale va de 10 à 50 augmentations.

Zoom – Augmentations
Le microscope stéréo dispose, généralement, d'un réglage continu et variable des augmentations, réglé par une roulette latérale.

Distance de travail
Il est très bon qu'il y ait une distance libre entre l'objet à mesurer et la lentille la plus basse du microscope. La distance comprise entre 80 et 120 millimètres, selon le type de fabrication du microscope, est idéale. Certains modèles spéciaux travaillent à une distance allant de 200 à 250 millimètres. De bonnes optiques ont normalement entre 10 et 25 millimètres à 40 augmentations.

Champ de vision
La base est le diamètre de l'image qu'émet le microscope avec 10 augmentations. Cela représente une caractéristique de qualité de toute optique et peut être vérifiée par le personnel non expérimenté. Règle générale: "Plus l'augmentation est petite, plus le champ de vision est grand".

Rapport entre la profondeur de champ et les augmentations
La profondeur de champ est l'espace devant et derrière le plan mis au point, sur lequel l'image apparaît nettement. La profondeur de champ dépend de différents facteurs et les augmentations du microscope jouent un rôle essentiel au moment de déterminer la plage de distance. Règle générale: Plus l'augmentation est grande, plus basse doit être la profondeur de champ. La fonction de la composition d'image joue un rôle important dans la microscopie. La microscopie numérique permet la création la plus effective d'images complètement nettes.

Profondeur de champ
Un microscope stéréo montre, d'habitude, avec peu d'augmentations, une profondeur de champ d'environ 10 millimètres, qui augmente considérablement l'impression de l'image plastique.

Réglage de la résolution et le contraste de l'image microscopique
Sous la platine du microscope, on trouve un condensateur qui se compose d'un système de lentilles et un iris, composé d'un diaphragme d'ouverture. La fonction de ce diaphragme utilisant la méthode de champ clair, se base sur la préparation optimale de la lumière du microscope pour l'objet correspondant. Si on ouvre le diaphragme du microscope, on augmente la résolution en même temps qu'on diminue le contraste. Si on ferme le diaphragme, il se produit le contraire: la résolution diminue mais le contraste augmente. La fonction du diaphragme d'ouverture permet de trouver l'équilibre optimal entre la résolution et le contraste. Dans le cas du microscope à contraste de phases, le diaphragme d'ouverture n'a aucune fonction et s'ouvre complètement, pour éviter des défauts dans la méthode de contraste.

Changement aux objectifs plus grands
Placez les cellules de la préparation que vous souhaitez analyser au centre de l'image, en déplaçant la platine pour que vous le trouviez à nouveau, lorsque vous changerez d'objectif. Tournez le revolver et sélectionnez le plus grand objectif. Dans la plupart des cas, la nouvelle image est assez nette. Vous réglerez la netteté grâce à la roulette micrométrique. Si vous voulez passer à l'objectif suivant, procédez de la même façon.

Ce que vous devez tenir en compte avec des grandes augmentations
Si vous devez beaucoup augmenter l'image, veillez à ce que le diaphragme ne soit pas trop fermé, car vous verrez des lignes doubles et l'image sera floue. Dans ce cas, vous devez ouvrir le diaphragme. Dans le cas contraire, si le diaphragme est complètement ouvert, l'image peut sembler déficiente, dans le sens où l'on ne peut rien distinguer. Dans ce cas, il faudra fermer un peu le diaphragme. Si l'image continue à être imparfaite, l'oculaire ou l'objectif sont probablement sales et vous devez les nettoyer.

Réglage de l'image nette
Fermez de moitié le diaphragme du condensateur. Déplacez lentement la platine vers l'objectif, en utilisant pour cela la roulette micrométrique tout en regardant dans l'oculaire. Quand vous commencez à distinguer les cellules de votre objet, réglez la netteté de l'image en utilisant la roulette micrométrique. Réglez aussi l'illumination avec la roulette correspondante. Si votre microscope ne permet pas de régler l'illumination, fermez un peu le diaphragme du condensateur si l'image est trop claire ou ouvrez-le si l'image est sombre.

La vidéo du PCE-MM 200 (disponible sur notre canal YouTube) montre à quel point les examens de surface sont simples avec ce microscope USB. Le PCE-MM 200 montre des objets en temps réel jusqu'à 200 augmentations sur un écran de PC. On obtient des images brillantes grâce aux 8 LEDs incorporées. L'objet est bien éclairé sous tous les angles. En plus, la régulation de la lumière est continue. Vous pouvez aussi utiliser le microscope comme webcam. Ce microscope est utile, par exemple, dans le domaine de l'enseignement, pour que les enfants puissent observer des détails non visibles de plantes, d'objets en miniature ou de petites créatures. Le microscope PCE-MM 200 aide aussi les numismates et les philatélistes. Le logiciel permet de calibrer le microscope avec un modèle de millimètres et de pouces, ce qui aide à mesurer facilement les distances depuis votre PC. Plus d'informations sur notre microscope USB.

Le champ d'utilisation du microscope et de la caméra microscopique est pratiquement illimité.

Utilisation des microscopes
Durant l'utilisation du microscope, deux erreurs déterminantes se produisent souvent:

- Un grossissement trop élevé a été réglé. Pour l'observation de sections d'objets simples, transparents, un grossissement entre 50x et 300x est suffisant pour un débutant. Un grossissement plus élevé est uniquement nécessaire pour observer des objets, coupés avec un microtome, et qui sont donc très fins. De cette façon, des grossissements très élevés (x 1.000 et supérieurs) s'utiliseront dans l'examen des analyses de sang.

- La préparation se détériore avec un faux réglage de l'objectif du microscope. Avec des grossissements supérieurs, il est possible de régler d'abord brièvement la clarté avant que l'objectif n'affecte la préparation. Par conséquent, pour un réglage approprié, l'objectif sera dirigé sur la préparation en étant fermé. Il sera ensuite possible de voir avec l'oculaire et de régler la clarté avec soin.

Exemple d'utilisation d'un microscope dans le domaine de l'électronique
En électronique, le microscope s'utilise dans une grande variété d'applications. Les microscopes numériques stationnaires sont utilisés pour le contrôle de qualité de la production et le montage des plaques. Par rapport aux microscopes optiques, ils ont l'avantage d'offrir de meilleures possibilités d'indication à l'utilisateur, ce qui lui permet d'examiner la plaque, segment par segment. L'inspection peut être vue directement sur un grand écran et, grâce aux options de stockage, normalement sur une carte SD, elle peut aussi être documentée. Selon le type de microscope, il est possible de stocker des photos et, dans certains autres aussi des vidéos. Les plaques sont vérifiées pour détecter des courts-circuits et des interruptions de la piste. Le microscope sert aussi à comparer les contours des trajectoires des conducteurs à la spécification du patron. Vous pouvez vérifier la continuité et les résidus des orifices et des voies.

La laque, résistante à la soudure, est soumise à une inspection optique par le microscope, pour garantir qu'elle s'étend uniformément et fait des taches. Une fois que le feu vert a été donné aux plaques et qu'elles sont assemblées, elles sont à nouveau examinées avec le microscope. Dans le cas des circuits intégrés ayant un interstice entre les broches, on vérifie d'abord si les broches se trouvent dans la surface de contact correspondante et si des courts-circuits se sont formés dans les broches du bain de soudure. Dans le cas des composants montés en surface (SMD, del inglés Surface Mount Device), le microscope sert à contrôler que les composants soient corrects, puisque leurs inscriptions ne sont pas visibles à l'œil nu.

Bien évidemment, les joints soudés sont aussi examinés pour voir s'il y a des fissures dans la soudure et les joints de soudure froide. Les joints de soudure froide n'ont pas de connexion entre la soudure et la fiche de connexion correspondante du composant. La détection des joints de soudure froide est souvent difficile puisque très compliquée à voir sans utiliser de microscope. La détection des joints de soudure froide est très importante puisqu'ils sont souvent à l'origine des montages électroniques qui ne sont plus fonctionnels ou seulement en partie.

Le microscope est aussi utilisé dans l'entretien et la réparation des assemblages électroniques. Cependant, comme il est souvent difficile de démonter la plaque, il vaudrait d'ailleurs mieux l'éviter, on utilise généralement un microscope numérique portable et petit. Celui-ci peut avoir une connexion USB pour que le moniteur du PC serve d'écran, ou intègre directement un écran au microscope. De même que pour la production, on vérifie aussi que les plaques n'aient pas de joints de soudure fissurés ou froids, de courts-circuits ou d'interruptions involontaires dans la trajectoire du conducteur qui se seraient produits pendant l'utilisation. En outre, les composants sont examinés afin de détecter de possibles fissures ou déformations thermiques.

Nettoyage des microscopes
L'une des conditions nécessaires pour obtenir des images nettes est que l'optique du microscope soit propre. Le problème principal est celui de la poussière. D'un côté, elle gêne au moment de visualiser l'image avec le microscope, et de l'autre, elle raye la surface en verre et abîme l'engrenage et la surface de glissement du microscope. Avant toute chose, il faut donc protéger le microscope de la poussière pour éviter des dommages, en le couvrant avec un tissu doux et facile à nettoyer. Il est nécessaire de nettoyer régulièrement ce tissu, pour éviter que la poussière ne pénètre dans le microscope. Il est aussi important que les ouvertures de la platine porte-échantillons soient toujours couvertes. Il est essentiel de faire la différence entre divers types de saleté au moment de nettoyer les éléments optiques du microscope: les particules de poussière (résidus de verre des couvre-objets, restes textiles, etc.) et la saleté en général (traces de doigts, etc.).

Parties essentielles des microscopes
Le microscope moderne peut être composé de différents éléments. Sur l'image ci-dessous, nous énumérons les parties les plus importantes du microscope.

Le pied est la base du microscope, sur lequel reposent les autres éléments. Le support du tube est une colonne, sur laquelle sont fixées l'optique et la platine. Le tube est presque toujours situé en oblique, rarement verticalement, dans la partie supérieure du microscope. Le support de travail avec une perforation au centre, s'appelle la platine. Pour régler la netteté, il a normalement deux roues, la roue de réglage micrométrique et celle du réglage micrométrique. Tous les autres éléments du microscope qui s'utilisent pour l'éclairage et le grossissement de l'échantillon, font partie de l'optique. Il faut regarder à travers l'oculaire qui se trouve dans le tube. Sur l'échantillon se trouvent les objectifs fixés au revolver pour pouvoir les changer instantanément. Sous la platine du microscope, il y a un système de lentilles appelé condensateur. Pour éclairer les échantillons, on utilise la source de lumière ou un miroir.

Observations pour l'utilisation d'un microscope
- Placez le microscope droit et sécurisé.
- Branchez le microscope sur le secteur.
- Abaissez la platine jusqu'à sa position la plus basse.
- Sélectionnez le plus petit objectif du revolver.
- Placez le porte-objet de façon à ce que l'objet soit placé au centre de la platine.
- Relevez la platine vers l'objectif. Vérifiez sur le côté que le couvre-objets en verre ne soit pas écrasé.
- Corrigez l'éclairage avec le diaphragme. Plus il est fermé, plus l'image sera nette.
- Sélectionnez ensuite l'objectif le plus grand. L'objet doit pouvoir se voir clairement. Dans le cas contraire, centrez-le à nouveau en utilisant un objectif plus petit.
- Effectuez la mise au point avec soin car la distance jusqu'à l'objet est inférieure. Éclairez-le un peu avec le diaphragme.
- Effectuez la mise au point de l'image en faisant tourner petit à petit le réglage macrométrique et micrométrique.
- Il peut être nécessaire de déplacer un peu le porte-objet pour centrer le champ de vision.

Le microscope stéréoscopique s'utilise surtout pour observer les caractéristiques internes d'un objet. L'usage d'une optique stéréo permet à nos yeux de voir l'image d'un même objet dans deux angles différents. Cela crée une impression en trois dimensions, c'est-à-dire, une impression spatiale.

Grossissement du microscope
Le grossissement du microscope est le produit de la multiplication du grossissement de l'objectif et du grossissement de l'oculaire. Exemple: microscope à zoom stéréo: un oculaire 12,5 grossissements et un zoom de l'objectif 0,8 jusqu'à 4,0 grossissements produisent un agrandissement total compris entre 10 et 50 grossissements etc.

Grossissement zoom
La plupart des modèles du microscope stéréo permettent de régler l'augmentation continue, à anneau strié extérieur.

Profondeur du champ
Le microscope stéréoscopique montre fréquemment une profondeur de champ de 10 mm, avec peu de grossissements, ce qui augmente considérablement l'effet d'une image plastique.

Distance de travail
Elle est bonne s'il existe une distance de travail entre le matériau à observer et la lentille de l'objectif inférieur du microscope. L'idéal se situe normalement entre 80 et 120 millimètres, selon le modèle du microscope. Le microscope de travail spécial offre une distance entre 200 et 250 millimètres. Pour une bonne optique, la distance est normalement entre 20 et 25 millimètres avec une augmentation de 10.

Champ de vision
Le critère est le diamètre de l'image du microscope observée avec une augmentation de 10. C'est une caractéristique de qualité de chaque optique et il peut même être vérifié par un personnel non spécialisé. Règle générale: plus le grossissement est petit, plus le diamètre du champ de vision est grand.

Rapport entre la profondeur du champ et l'augmentation
La netteté de la profondeur est la plage de distance avant et arrière du plan focal, où l'image apparaît "nette". Alors que la netteté de la profondeur dépend de différents facteurs, l'augmentation du microscope joue un rôle important dans la détermination de la grandeur de cette plage de distance. En général: plus l'augmentation est élevée, plus la netteté de la profondeur est faible. La fonction de composition de l'image jour un rôle important dans la microscopie et le microscope numérique permet de créer, de façon bien plus effective, des images nettes sur toute la surface.

Régler la résolution et le contraste de l'image microscopique
Sous le plateau du microscope se trouve le condenseur, qui est composé d'un système de lentilles et d'un diaphragme d'iris. La fonction de ce diaphragme dans le processus normal de lumière est la préparation optimale de la lumière du microscope pour l'objectif correspondant. Si l'ouverture du diaphragme du microscope s'ouvre, la résolution à contraste décroissant augmente. Lorsqu'il est fermé, on peut observer qu'au contraire, la résolution diminue avec une augmentation simultanée du contraste. La fonction d'ouverture du diaphragme est donc de régler un compromis optimum entre la résolution et le contraste pour l'échantillon correspondant. Pour le microscope à contraste de phase ou à champ sombre, l'ouverture du diaphragme n'a aucune fonction et c'est pourquoi, dans ce processus de contraste, il s'ouvre complètement pour éviter les pannes.

De quoi faut-il tenir compte pour travailler avec un microscope
- Les oculaires et les objectifs du microscope doivent être propres. Sinon, l'image ne sera pas nette.
- Activez l'éclairage.
- Le plus petit objectif doit être placé sur la platine.
- Placez le plus petit objectif sur le plateau.
- Placez la préparation au centre, sur le porte-échantillons, sur le condensateur.

Réglage d'une image nette
Fermez le diaphragme de moitié dans le condensateur. Faites bouger lentement, à l'aide du mécanisme de macro mise au point, le plus petit objectif du microscope sur l'échantillon, en regardant par l'oculaire. Dès que vous pourrez reconnaître les cellules à travers l'objectif, réglez la netteté de l'image de façon plus précise avec le mécanisme de micro mise au point. Réglez aussi la clarté avec la touche de réglage pour l'éclairage en fixant une intensité de lumière qui vous est adéquate. Si votre microscope possède un éclairage réglable, fermez un peu plus le diaphragme dans le condensateur si l'image est trop claire, ou alors ouvrez-le si l'image est trop sombre.

Fluorescence
La couleur verte des feuilles des plantes (la chlorophylle), sous l'effet de l'excitation naturelle de la lumière à onde courte, devient fluorescente dans une lumière rouge intense. Pour l'observation de cette fluorescence primaire avec le microscope, aucune préparation n'est nécessaire. Dans une fluorescence secondaire les objets qui ne deviennent pas fluorescents sont marqués avec un colorant fluorescent. L'un des colorants fluorescents connu est l'Acridine orange qui, par excitation du noyau de la cellule dans une lumière bleue, montre une fluorescence verte. Etant donné que la fluorescence se produit uniquement avec la préparation du colorant fluorescent, on peut aussi parler d'une fluorescence induite.

Dans la fluorescence immunisée, un colorant fluorescent s'ajuste (il s'agit presque toujours du FITC = Fluorescéine-isothiocyanate) avec un anticorps. Ces anticorps peuvent se produire de façon très spécifique dans certaines structures biologiques. L'union du colorant se transmet pratiquement à travers l'anticorps. Ces colorations sont extrêmement sélectives, cependant, elles ne le sont pas autant que la fluorescence secondaire traditionnelle.

Changement dans les microscopes à de plus grands objectifs
Positionnez les cellules de l'échantillon que vous désirez observer avec plus de grossissement au centre de l'image, pour que vous puissiez le retrouver au moment de changer l'objectif. Changez l'objectif du microscope en bougeant le revolver. La nouvelle image est presque toujours nette. Le réglage de la netteté s'obtient par le réglage micrométrique. Suivez le même processus pour mettre un objectif avec encore plus de grossissement.

A tenir compte en travaillant avec de forts grossissements
En travaillant avec de forts grossissements, le diaphragme du microscope ne doit pas être trop fermé, car cela pourrait faire voir les lignes doubles et une image pas nette. Dans ce cas, vous devez ouvrir le diaphragme. Si le diaphragme est complètement ouvert, l'image peut apparaître faiblement, au point de pouvoir à peine la reconnaître. Dans ce cas il vous faudra fermer un peu le diaphragme. Si après avoir fait un réglage correct, vous avez encore une image déficiente, le problème vient probablement de l'oculaire ou de l'objectif du microscope qui est sale. Vous devrez alors nettoyer les lentilles correspondantes.

Microscopes stéréos à lumière reflétée et lumière transmise
Ce microscope s'utilise principalement pour visualiser de plus grands objets. Le domaine d'utilisation est, par exemple, l'analyse d'insectes, de plantes, de monnaies ou la vérification de matériaux. Le microscope à lumière reflétée a généralement une distance de travail de plus de 40 mm. Par conséquent, ce microscope est parfait pour travailler avec de grands objets ou pour la vérification de matériaux. Ce microscope est normalement proposé comme modèle binoculaire.

Microscopes digitaux
La microscopie numérique va de pair avec la microscopie conventionnelle. Les essais ne s'analysent pas directement à travers l'oculaire du microscope, mais ils se présentent en tant qu'image virtuelle complète, qui, après avoir scanné totalement l'essai, apparaît sur l'écran avec la résolution désirée. Un autofocus intégré garantit que l'image soit toujours bien centrée, et par conséquent nette. Les images produites avec le scanner se chevauchent automatiquement pour produire finalement une image complète. L'image finale virtuelle peut s'enregistrer dans une base de données.

Microscopes à lumière reflétée
Ce microscope s'utilise principalement pour observer des préparations transparentes et liquides, comme, par exemple, pour les analyses de sang, de cellules, de tests sur des plantes. Le microscope classique à lumière reflétée a une distance de travail très infime, en dessous de 4 mm. Par conséquent, ce genre de microscope est indiqué pour les préparations très fines.

Les préparations se posent sur le porte-échantillons et se couvrent avec le couvre-échantillons. Le microscope à lumière reflétée a normalement de nombreux grossissements (de 40 à plus de 1000 grossissements). Pour des études à 1000 grossissements, il est nécessaire de mettre une goutte d'huile d'immersion pour fermer l'espace d'air situé entre le porte-échantillons et le couvre-échantillons. Des images de plus de 400 grossissements peuvent se voir avec n'importe quel appareil sans aucune technique particulière. En changeant les oculaires, les grossissements du microscope à lumière reflétée peuvent être augmentés.

Microscopes électroniques
Il s'agit d'un microscope qui utilise des électrons au lieu de la lumière visible (photons) pour former des images de petits objets. Ce type de microscope augmente la vitesse des électrons pour obtenir une longueur d'onde plus courte et avoir une plus grande résolution (les électrons ont une longueur d'onde assez inférieure par rapport à celle de la lumière visible et par conséquent ils peuvent désagréger des structures très petites) obtenant ainsi une capacité de grossissement allant jusqu'à 500000 grossissements en comparaison avec d'autres types de microscope optiques. Les images d'origine obtenues sont en noir et blanc puisque l'on utilise des électrons au lieu de la lumière. Le faisceau électronique se produit avec une cathode de wolfram.

La meilleure résolution du microscope moderne est aussi de 2 nm, dans le meilleur des cas, et avec le REM de 3 nm, avec le TEM, elle est même de 0,2 nm. Pour obtenir des structures plus fines, vous pouvez utiliser un microscope à effet tunnel ou un microscope à force atomique.

Variantes de la microscopie électronique:
La Microscopie Électronique en Transmission (TEM)
Ici, les électrons sont éclairés à travers un objet mince. La microscopie TEM correspond principalement à la microscopie de lumière transmise, dans laquelle l'absorption joue un rôle important. Actuellement, la puissance de résolution est d'environ 0,05 nm.

La Microscopie Électronique à Balayage (SEM – Scanning Elektron Microscopy)
Un faisceau d'électrons finement regroupés est guidé dans une grille spécifique sur l'échantillon recouvert de métal précieux. Les électrons secondaires (contraste) émis depuis la surface de l'objet sont mesurés comme un signal et sont convertis en une image optique. Pour obtenir un faisceau d'électrons sans perturbations, la mesure se fait dans le vide.

La microscopie à force atomique (AFM – Atomic Force Microscopy)
Cette méthode s'utilise pour la représentation de la surface. À l'aide d'une aiguille "atomique" unie à une arbalète, l'échantillon est scanné dans une grille définie. Les forces atomiques maintiennent une distance constante par rapport à la surface. La flexion du ressort à lame est enregistrée par les capteurs optiques, par réfléchissement du rayon laser, et est affichée ligne par ligne. En fonction de la rugosité à tester, des différences latérales sont enregistrée dans une plage allant de 0,1 à 10 nm.

La microscopie à effet tunnel (STM – Scanning Tunnelling Microscopy)
Dans la microscopie à effet tunnel, les surfaces sont visualisées en train de mesurer le débit du courant entre une pointe conductrice d'électricité et l'échantillon lui aussi conducteur. Les échantillons non conducteurs d'électricité doivent être vaporisés avec de l'or, du graphite ou du chrome. Ici aussi, la pointe est guidée sur l'objet dans une grille spécifique.

Microscope monoculaire, binoculaire et trinoculaire
Le microscope monoculaire est le moins cher pour commencer dans le monde de la microscopie. Il ne perd pas de visibilité en n'utilisant qu'un seul objectif. Pour une visualisation prolongée et plus aisée, il est préférable de travailler avec un microscope binoculaire. En utilisant les deux yeux, la vision est plus aisée pendant plus de temps. Le microscope binoculaire a, en plus des éléments standards, une disposition de prismes plus complexe et un éclairage plus puissant.

Le microscope trinoculaire permet de sauvegarder des images. Il s'agit d'un microscope binoculaire avec un tube supplémentaire comportant une caméra USB qui enregistre les images. Les images enregistrées peuvent être transmises par la suite à un PC ou à un ordinateur portable. Il est aussi possible de connecter un micro oculaire au microscope binoculaire. Ce micro oculaire se pose simplement sur un des oculaires du microscope. Le micro oculaire vous donne la possibilité de transformer à bon marché le microscope en vidéo microscope.

La microscopie à rayons X
Dans la microscopie à rayons X, les rayons X sont utilisés comme source de radiation. Du fait de la moindre longueur d'onde des rayons X, la résolution est bien plus élevée que celle de la lumière. D'autres interactions (capacité de pénétration) de l'échantillon peuvent aussi être mesurées avec les rayons X. Un grand avantage de la microscopie des rayons X est que les échantillons peuvent être plus épais qu'avec la microscopie électronique. Par ailleurs, la conductivité électrique de la surface n'est pas nécessaire, le matériau biologique n'a pas besoin d'être teint, inséré dans un matériau support ou découpé en échantillons extrêmement fins.

Le microscope confocal
Ce type de microscope est une forme spéciale de microscopie de lumière ou fluorescence: des sections optiques très minces sont "scannées" et assemblées en une image 3D. Comme toutes les sections sont optiquement nettes, une image 3D totalement focalisée est créée.

Pour les applications qui nécessitent d'être prises sous forme d'images, il existe aussi le microscope trinoculaire ou le microscope à appareil photo. Il s'agit de microscopes binoculaires avec un tube supplémentaire. Un appareil photo USB peut être connecté pendant l'analyse, afin d'enregistrer les observations. Les images enregistrées peuvent être transférées à un PC ou à un ordinateur portable. Il existe, en outre, la possibilité de connecter un micro oculaire aux microscopes binoculaires, en l'insérant dans la monture de l'oculaire du microscope. Le microoculaire vous donne la possibilité d'actualiser votre microscope en un microscope vidéo ou à appareil photo à un prix raisonnable et, de cette façon, l'actualiser par rapport à la technique actuelle.

Exigences demandées aux microscopes
Selon l'usage que vous allez en faire, il vous faudra être plus ou moins exigeant sur l'équipement. Un microscope normal à 400 ou 600 grossissements a généralement un éclairage suffisant. L'éclairage spécial comme le contraste de phase, le champ sombre et l'éclairage halogène puissant permettent un examen des détails des objets sans contraste, sans avoir besoin de teindre la préparation.